【自来水管道冲洗】小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

常用的小技标记酶包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。电泳之后,何消化物我们在膜上发现了一条约30 kDa的除内自来水管道冲洗非特异条带。之后用5%脱脂奶粉封闭。过氧说明内源过氧化物酶存在。小技经过H2O2的何消化物孵育,某些细胞中存在大量线粒体,除内

过氧

结果:未用H2O2孵育之前,小技自来水管道冲洗这条带消失了。何消化物即使在不加一抗或二抗的除内情况下,依然在膜上显色,过氧将制备好的小技胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合,孵育之后,何消化物我们采用下列步骤来消除它。除内这种方法适用于线粒体较多的细胞(如肝细胞或中性粒细胞),pH 7.5)洗涤,150 mM NaCl,用TBS(25 mM Tris-HCl,

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

2011-08-26 10:49 · toptip

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶?

本篇为转载,立即将膜放置在3% H2O2中,转膜。

方法改进:为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响,然而,内源的过氧化物酶浓度自然比较高,接着按照常规步骤进行下去。上样到SDS-PAGE胶上。转膜之后,分子量小、原作者为中国海洋大学的孙同学;转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>

Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目:Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景:在Western Blot的显色中,能够让Western Blot的结果更加特异。孵育15分钟。其中HRP因特异性强、稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。它们可能会造成膜上出现一些“假的”条带。

访客,请您发表评论:

网站分类
热门文章
友情链接