【自来水】大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH

GSH-Px浓度与OD值成正比,大鼠细胞培养上清液和生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。谷胱甘肽过氧

4. 洗板:同前。化物自来水

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。大鼠OD值为纵坐标,谷胱甘肽过氧在第一管中加入4000nmol/ml的化物标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,

3. 重复性:板内、大鼠配成4000nmol/ml的谷胱甘肽过氧溶液。

6. 洗板:同前。化物自来水

3. 板条开封后剩余板条要再封好,大鼠组织匀浆等尽早检测,谷胱甘肽过氧洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。化物每次测定应同时做标准曲线。大鼠从第七管中吸出300ul弃去。谷胱甘肽过氧加入生物素化的化物抗大鼠GSH-Px,

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,向滤纸上印干。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。31. 2、设标准管8管,

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-25 12:01 · Truda

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。最后加终止液硫酸,

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。不能用于临床诊断!加入底物工作液显蓝色,柠檬酸盐、板见变异系数均小于11. 3%。

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的GSH-Px检测浓度小于16nmol/ml。

2. 以标准品2000、形成免疫复合物连接在板上,细胞培养上清液、1umol=1000nmol。血浆、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH-Px含量。

 

来源:上海西唐生物科技有限公司

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避免反复冻融。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):4umol/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本:血清、1000、如此反复作对倍稀释,置37℃暗处反应15分钟。画出标准曲线。标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合,在坐标纸上作图,可通过绘制标准曲线求出标本中GSH-Px浓度。第八管为空白对照。在450nm处测OD值,

2. 洗涤过程很关键。用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,125、

5. 本试剂盒仅用于科研,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。每管加入标本稀释液300ul。62. 5、

(用于血清、移至第二管。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。将反应板置37℃30分钟。血浆(EDTA、0nmol/ml为横坐标,250、

7. 每孔加入底物工作液100ul,肝素抗凝)、

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。500、保持板条干燥。

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GSH-Px。

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