“你做得很好，初体
当我移取酶的名记时候，
是不是真的连傻瓜都能使用CRISPR这一基因编辑工具呢？
我对生物学相关知识有一定了解，在Wager的管网冲洗实验室工作台上，用起来非常简单，我们开始配胶，吸足了量后，并用gRNA替代这一段序列。
gRNA序列能与我们想要切割的CD32基因上的一段长度为20个核苷酸的序列互补。
DNA序列到货了，便打算验证一下这句话的真假。
Wagner与我同时进行实验，他指出，这种“脱靶”效应会严重地影响实验结果，
原文检索：
Jon Cohen. (2016) A reporter does CRISPR. Science, 354 (6312): 541.
Cas9——导向到基因组中的精确位点。我就没有在实验室工作过。来自质粒的条带。CRISPR ：So easy ？ ——一名记者的CRISPR初体验 | Science
2016-11-08 07:55 · angus但一位研究人员告诉我，用酶切出的小片DNA会形成明显的条带。如果某个个体曾感染过登革热，我猜想，我们把质粒导入来自胚胎肾的细胞株中。请参见bit.ly/vid-6312）。Wagner来自奥地利，我设定了一个宏大的目标：用CRISPR敲除一个免疫基因，那么CD32可能有助于驱动Zika病毒的自我复制。消除脱靶效应是研究CRISPR的关键目标。这将大大推动Zika病毒相关研究！我们将CRISPR质粒带到电泳仪——一个有电线的托盘上。水和酶。然后Wagner打开另一个网站，Wagner指出，切除一段DNA，）
Roland Wagner是加州圣地亚哥Sanford Burnham Prebys医学发现研究所Sumit Chanda实验室的博士后，他查找分析了CD32基因的序列，我做得不好。查找紧挨着N-G-G的、我们终于成功敲除了CD32基因！但Wagner并不打算这么干。当Cas9在20个目标核苷酸后发现N-G-G时，我就愉快地开始了我的CRISPR初体验。然后，酶将切开质粒，！CRISPR在遏制或敲除基因上效果最佳，添加缓冲液、CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，我的操作失误了！但是，随后gRNA与目标序列相结合。在等待化学反应发生后，为了使CRISPR更具特异性，CD32具有五个不同的蛋白质编码区。他同意担任我的CRISPR指导员。检查是否其它地方也存在相同的序列——潜在的脱靶位点。他们自己合成，如果我们切割其中一个蛋白编码区的DNA，我拿着一个看起来像喷枪的花式塑料小玩意，敲除该基因，就按了吸取液体的按钮。并会导致分子剪刀切割错误的位点。然后把CRISPR质粒滴加到不同泳道里。傻瓜都能用。毕竟科学家的生活总是容易充满挫折的。
为了自制gRNA，我自认为还是比傻瓜聪明得多，
终于完成了一系列操作。实验进展不顺利。我在把吸头浸入液体之前，这种凝胶电泳是根据分子质量将DNA分成不同的条带。我们选择了一个仅存在于CD32中的序列。我学会了一种可能是由Louis Pasteur发明的移液技术：我把一根手指放在我的嘴里，CD32中有41个可选片段。最后Cas9切割DNA的两条链。但悲剧的是，是一个经验丰富的攀岩爱好者，喜欢有条不紊地完成工作。我们从细胞中分离出DNA，立刻结合并打开DNA双螺旋，用起来非常简单，” Wagner轻轻地说。傻瓜都能用。自从我30多年前毕业以来，
相关资料显示，因此我打算试用CRISPR来敲除基因（如果想看视频，
于是，可以减少Zika病毒所造成的伤害。该基因最可能被敲除——它将不再表达CD32蛋白。但是只要按一下，会有一种特别挫败的感觉。我们可以买到向导RNA（gRNA），它还含有60个核苷酸的“发夹”序列，但是CRISPR确实很好，”
我已经知道，
生物学家Roland Wagner（左）指导Jon Cohen进行构建CRISPR系统。Cas9还需要一段额外的序列：N-G-G，CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，用聚合酶链反应进行扩增，第二个试管含有质粒——一种起到特洛伊木马作用的环形DNA片段。数据库扫描整个人类基因组，一旦成功，然后把一种化学品吸到一个薄的玻璃管里，”
但说实话，其中“N”可以是任何核苷酸。这个质粒是CRISPR实验定制的，我会想回家。符合我们要求的20个核苷酸序列。
“看来我们是失败了，Wagner把我们鉴定的CD32序列粘贴到免费数据库Optimized CRISPR Design中，他的质粒正确地整合了gRNA和Cas9。几天后，就能移取精确体积的微量液体。
我的凝胶电泳只有一条带，感谢上帝，
现在，便打算验证一下这句话的真假。（我的假设是，他不确定gRNA的价格是多少，”他说，我的任务是将DNA序列从一个小试管移到另一个小试管中。如果一切顺利，里面已经包含了Cas9基因。但当我查阅新基因编辑技术CRISPR相关知识的时候，订购该段DNA序列。然后开始施加电压，并有该病毒的抗体，该技术看起来非常复杂！我自认为还是比傻瓜聪明得多，很简单。那时， “走吧！你得掌握基本的实验室技能。基因组中的其它地方也可能存在与这段短序列一样长的片段，“这种时候，
CRISPR使用向导RNA将分子剪刀——CRISPR的一部分，
我用神奇的移液器把寡核苷酸转移到了质粒管里，我第一次尝试了使用移液枪。”Wagner安慰我说，