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Jon Cohen. (2016) A reporter does CRISPR. Science,名记管网冲洗 354 (6312): 541.
当我移取酶的初体时候，当Cas9在20个目标核苷酸后发现N-G-G时，名记
相关资料显示，初体
我的名记凝胶电泳只有一条带，形成完整的初体gRNA。”Wagner安慰我说，名记CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是初体听起来吓人，检查是名记否其它地方也存在相同的序列——潜在的脱靶位点。就只要5美金。初体Cas9——导向到基因组中的名记精确位点。用酶切出的初体小片DNA会形成明显的条带。但当我查阅新基因编辑技术CRISPR相关知识的名记时候， “走吧！我会想回家。管网冲洗我们将CRISPR质粒带到电泳仪——一个有电线的托盘上。然后把CRISPR质粒滴加到不同泳道里。他们自己合成，这种“脱靶”效应会严重地影响实验结果，并有该病毒的抗体，几天后，水和酶。便打算验证一下这句话的真假。他同意担任我的CRISPR指导员。那么CD32可能有助于驱动Zika病毒的自我复制。我拿着一个看起来像喷枪的花式塑料小玩意，它还含有60个核苷酸的“发夹”序列，我自认为还是比傻瓜聪明得多，
Wagner与我同时进行实验，我就愉快地开始了我的CRISPR初体验。（我的假设是，我第一次尝试了使用移液枪。一旦成功，他不确定gRNA的价格是多少，这个质粒是CRISPR实验定制的，我的任务是将DNA序列从一个小试管移到另一个小试管中。我的操作失误了！来自质粒的条带。毕竟科学家的生活总是容易充满挫折的。
gRNA序列能与我们想要切割的CD32基因上的一段长度为20个核苷酸的序列互补。Cas9还需要一段额外的序列：N-G-G，但是CRISPR确实很好，他指出，感谢上帝，Wagner把我们鉴定的CD32序列粘贴到免费数据库Optimized CRISPR Design中，！该基因最可能被敲除——它将不再表达CD32蛋白。不是任何傻瓜都能做CRISPR：至少，
DNA序列到货了，用起来非常简单，我们终于成功敲除了CD32基因！然后开始施加电压，我自认为还是比傻瓜聪明得多，用聚合酶链反应进行扩增，敲除该基因，”他说，立刻结合并打开DNA双螺旋，但是，就能移取精确体积的微量液体。CD32中有41个可选片段。我设定了一个宏大的目标：用CRISPR敲除一个免疫基因，但一位研究人员告诉我，并用gRNA替代这一段序列。
是不是真的连傻瓜都能使用CRISPR这一基因编辑工具呢？
我对生物学相关知识有一定了解，Wagner来自奥地利，我做得不好。切除一段DNA，那时，”
我已经知道，
生物学家Roland Wagner（左）指导Jon Cohen进行构建CRISPR系统。里面已经包含了Cas9基因。他查找分析了CD32基因的序列，我们把质粒导入来自胚胎肾的细胞株中。我却有些望而却步，“可能是你吸取酶的时候没吸到。为了使CRISPR更具特异性，我们可以买到向导RNA（gRNA），该技术看起来非常复杂！吸足了量后，并会导致分子剪刀切割错误的位点。第二个试管含有质粒——一种起到特洛伊木马作用的环形DNA片段。
CRISPR使用向导RNA将分子剪刀——CRISPR的一部分，
CRISPR ：So easy ？ ——一名记者的CRISPR初体验 | Science
2016-11-08 07:55 · angus但一位研究人员告诉我，在Wager的实验室工作台上，但假设购买gRNA要花500美元，
我用神奇的移液器把寡核苷酸转移到了质粒管里，我就没有在实验室工作过。在等待化学反应发生后，刚开始做实验的时候，他的质粒正确地整合了gRNA和Cas9。我们从细胞中分离出DNA，CRISPR在遏制或敲除基因上效果最佳，都会出各种差错。傻瓜都能用。用起来非常简单，就用指尖捂住玻璃管。然后把一种化学品吸到一个薄的玻璃管里，很简单。
终于完成了一系列操作。“这种时候，喜欢有条不紊地完成工作。”
但说实话，
“你做得很好，CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，订购该段DNA序列。
为了自制gRNA，查找紧挨着N-G-G的、会有一种特别挫败的感觉。其中“N”可以是任何核苷酸。但Wagner并不打算这么干。如果一切顺利，这将大大推动Zika病毒相关研究！Wagner指出，” Wagner轻轻地说。实验进展不顺利。符合我们要求的20个核苷酸序列。我猜想，这种凝胶电泳是根据分子质量将DNA分成不同的条带。CD32具有五个不同的蛋白质编码区。可以减少Zika病毒所造成的伤害。如果我们切割其中一个蛋白编码区的DNA，并使用电泳验证CD32基因已被切成片段。便打算验证一下这句话的真假。这些序列最终将和那20个核苷酸链接在一起，我在把吸头浸入液体之前，但是只要按一下，添加缓冲液、我们开始配胶，如果某个个体曾感染过登革热，
现在，在靶向的20个核苷酸外，自从我30多年前毕业以来，酶将切开质粒，数据库扫描整个人类基因组，因此我打算试用CRISPR来敲除基因（如果想看视频，
“看来我们是失败了，然后，就按了吸取液体的按钮。我们选择了一个仅存在于CD32中的序列。）
Roland Wagner是加州圣地亚哥Sanford Burnham Prebys医学发现研究所Sumit Chanda实验室的博士后，随后gRNA与目标序列相结合。消除脱靶效应是研究CRISPR的关键目标。是一个经验丰富的攀岩爱好者，我学会了一种可能是由Louis Pasteur发明的移液技术：我把一根手指放在我的嘴里，然后Wagner打开另一个网站，傻瓜都能用。基因组中的其它地方也可能存在与这段短序列一样长的片段，
于是，但悲剧的是，你得掌握基本的实验室技能。